"GNM細胞:人上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關(guān)鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
NALM-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
HeLa S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
NF639細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細胞、Cates-1B細胞、NPC-TW039細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、Hs729T細胞、H-508細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、CL1.0細胞、HEC1-B細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細胞、SN12PM6細胞、U266B1細胞
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