"DOK細(xì)胞：人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：口腔異常增生；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
Calu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
Panc 03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
Panc-327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
HPAF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
HBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-2細(xì)胞、SKO3細(xì)胞、GM03571細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞
I90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 13細(xì)胞、SW1463細(xì)胞、INS-1細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
HBL 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞
PL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、PF-382細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、A2780細(xì)胞
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
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