"LNCaP C4-2B細胞：人前列腺癌細胞系
細胞背景資料：前列腺癌；左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
BEND細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
SU86_86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞
HNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
NR-8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、EFO-27細胞、Tn-5細胞
SN12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H727細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、OVCAR-432細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HCA 7細胞、NCI-H1563細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細胞、C8166細胞、RF/6A細胞
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