"LNCaP C4-2細胞：人前列腺癌細胞系
細胞背景資料：前列腺癌；左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥Ｎ艺務(wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
H-1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
HEp-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
NCI-H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
CaEs17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
Hs 737.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、HS578T細胞、HCMEC細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、JVM-2細胞、293/EBNA細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細胞、Lec1細胞、SW-1573細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、NB19細胞、H69/P細胞
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