"SW1353細胞：人軟骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：骨肉瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
H-87細胞系相關產(chǎn)品：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
OE-33細胞系相關產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
EC-GI細胞系相關產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
87MG細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
A-375.S2細胞系相關產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
HCT 8細胞系相關產(chǎn)品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
C666-1細胞系相關產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關產(chǎn)品：Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
HLF-a細胞系相關產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
A-375細胞系相關產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
HTh-74細胞系相關產(chǎn)品：Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞
VMCUB1細胞系相關產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
Pa017C細胞系相關產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
OE-21細胞系相關產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
CCC-HEL-1細胞系相關產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
NIH/3T3細胞系相關產(chǎn)品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
MG63細胞系相關產(chǎn)品：SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
H1417細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
KRCY細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
H1944細胞系相關產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
Hs 766.T細胞系相關產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
HCT116細胞系相關產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
YTMLC-90細胞系相關產(chǎn)品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
SL-29細胞系相關產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
NR-8383細胞系相關產(chǎn)品：SU4細胞、NK92細胞、HFL 1細胞
NCI H345細胞系相關產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
U-138 MG細胞系相關產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
NCIH1869細胞系相關產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
NCI H69細胞系相關產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
DMS79細胞系相關產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
CNE2Z細胞系相關產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
LSECs細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
ETCC007細胞系相關產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
NCIH2347細胞系相關產(chǎn)品：SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
CSQT-2細胞系相關產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
JROECL33細胞系相關產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
HS-294-T細胞系相關產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
HS940細胞系相關產(chǎn)品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
HGMC細胞系相關產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
COV 504細胞系相關產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
MGECs細胞系相關產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
L-540細胞系相關產(chǎn)品：FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
NCI-H128細胞系相關產(chǎn)品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
ECC-1細胞系相關產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
NCI-H1930細胞系相關產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
Mv1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
MLMA細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
L 428細胞系相關產(chǎn)品：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
BT 549細胞系相關產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
LS-174T細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
C2BBe 1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-510細胞、MRC5細胞、NCI-H125細胞
OLN 93細胞系相關產(chǎn)品：Co320細胞、H-1693細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、MOLT 3細胞、MDA 1386細胞
GM02131A細胞系相關產(chǎn)品：SNU-368細胞、YES2細胞、COLO-320DM細胞
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