"A-375細胞：人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
RAW 264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
Caco2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
Vero E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞
LS-513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial細胞： 1細胞、HUT 28細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細胞、RBVEC細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、Hs445細胞、COR-L88細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、WEHI 231細胞、Panc02-H0細胞
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、NCIH1869細胞、IPLB-SF 21細胞
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