"A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：A３７５源自一位５４歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
HRC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞凍存基本方法：１．細(xì)胞：選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，收集細(xì)胞２４小時(shí)前換液一次。２．計(jì)數(shù)：按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，令細(xì)胞密度達(dá)５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。４．分裝：分裝入無(wú)菌安剖中，每安剖加１.５毫升細(xì)胞懸液。５．封口：用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細(xì)檢查，定要封嚴(yán)，必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察，為安全起見(jiàn)，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細(xì)胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞
BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞
H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞
ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
A-375 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
PG-4 (S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細(xì)胞、MCF7細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、HuT78細(xì)胞
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