"C8-D1A細胞：鼠小腦細胞系
細胞背景資料：該永生化細胞系源自出生８天小鼠小腦組織，由B Pessac, D Trisler建立。該細胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞特征。該細胞為GFAP陽性細胞，除此之外，沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分子標記。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
HSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
B-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞
My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
U-373MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
P116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
NCI-SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
DLM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
MBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
HEC-151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
GM03570E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
U87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial細胞： 1細胞、HUT 28細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、SBC-3細胞、MOLT-16細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細胞、U937細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、HCC366細胞、M210B4細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP1細胞、MiaPaCa2細胞、NCIH1688細胞
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