"H9c2(2-1)細胞：大鼠胚胎心肌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
TB1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
C57 Mouse Tumor 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞
GM 637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
Kit 225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1385細胞、JCA1細胞、NCIH1395細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、HEL-1細胞、Hs281T細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、SF767細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、M1細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
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