"H9c2(2-1) epithelioid cells大鼠胚胎心肌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞 MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞 細胞生長:貼壁 H9c2(2-1) epithelioid cells大鼠胚胎心肌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2傳代 OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞 H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞 Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞 SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 H9c2(2-1) epithelioid cells大鼠胚胎心肌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞 MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞 PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞 SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞 HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞 Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞 HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞 L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 Kit225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞 H9c2(2-1) epithelioid cells大鼠胚胎心肌細胞系 BE2-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞 Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞 SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞 Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞 Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞 GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞 MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞 H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞 SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞 J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞 SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞 WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞 Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞 Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞 SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞 H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞 OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞 CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞 UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞 GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞 NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞 HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞 PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞 IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞 TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞 CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞 T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞 HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞 OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞 H-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞 SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞 RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞 LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞 OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞 Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞 UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞 LTEP-a-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞 Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞 KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞 PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞 EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞 OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞 U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 H9c2(2-1) epithelioid cells大鼠胚胎心肌細胞系 PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞 RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細胞、RDES-1細胞、MOLT 16細胞 Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、L-1210細胞、UK Pan-1細胞 PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、LTEP-sm 1細胞、HCPEpiC細胞 "
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