抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體 別 名 COL 3A1; COL3A1; Collagen alpha 1(III) chain; Collagen III alpha 1 chain precursor; Collagen III alpha 1 polypeptide; Collagen type III alpha 1 (Ehlers Danlos syndrome type IV autosomal dominant); Collagen type III alpha 1; Collagen type III alpha; EDS4A; Ehlers Danlos syndrome type IV, autosomal dominant; Fetal collagen; Type III collagen; CO3A1_HUMAN; Collagen alpha-1(III) chain; Type III collagen; type III preprocollagen alpha 1 chain..
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-Collagen III
中文名稱 Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 干細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 117kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Collagen alpha 1(III) chain
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
圓酵毛殼現(xiàn)貨,ATCC菌株
琥珀毛殼培養(yǎng),ATCC菌株
反曲毛殼保存,ATCC菌株
橄欖包毛殼售價,ATCC菌株
球毛殼現(xiàn)貨,ATCC菌株
長刺毛殼培養(yǎng),ATCC菌株
巴西毛殼保存,ATCC菌株
頂頭孢霉售價,ATCC菌株
半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb)規(guī)格:48T/96T
GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)ELISA Kit for GATA Binding Protein 5 (GATA5)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)規(guī)格:48T/96T
蛋白關(guān)聯(lián)磷酶A2(LpPLA2)ELISA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2)規(guī)格:48T/96T
尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR)規(guī)格:48T/96T
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1)規(guī)格:48T/96T
Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA Kit for Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)規(guī)格:48T/96T
大型中性基轉(zhuǎn)運蛋白1(LAT1)ELISA Kit for Large Neutral Amino Acid Transporter 1 (LAT1)規(guī)格:48T/96T
β細(xì)胞素(βTC)ELISA Kit for Betacellulin (bTC)規(guī)格:48T/96T
纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA Kit for Fibrinogen Degradation Product (FDP)規(guī)格:48T/96T
尼克酰腺嘌呤二核苷磷氧化酶5(NOX5)ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5 (NOX5)規(guī)格:48T/96T
BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Kazinol B中文名:別名:分子式:C25H28O4
BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體Formononetin中文名:芒柄花素別名:分子式:C16H12O4
BXDC2蛋白抗體Cajanin中文名:別名:分子式:C16H12O6
BOLA1蛋白抗體3,7-Di-O-methylquercetin中文名:3,7-二-O-甲基槲皮素別名:分子式:C17H14O7
BOLA2蛋白抗體Bilobetin中文名:白果黃素別名:分子式:C31H20O10
Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體 Paecilomyces lilacinus種屬:Paecilomyces lilacinus
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:脂肪合成。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。
生長條件:28℃,好氧
存儲條件:真空冷凍干燥法淡紫擬青霉(斜面)