抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Collagen I/COL1A2
中文名稱 Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體
別 名 Collagen type I; Alpha 1 type I collagen; Alpha 2 type I collagen; COL1A1; COL1A2; Collagen I alpha 1 polypeptide; Collagen I alpha 2 polypeptide; Collagen Of Skin Tendon And Bone; Collagen Type 1; Collagen type I alpha 1; Collagen type I alpha 2; OI4; Osteogenesis Imperfecta Type IV; Pro alpha 1(I) collagen; Type I procollagen; CO1A1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 95kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Collagen alpha-1(I) chain
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
郎比可假絲酵母現(xiàn)貨,ATCC菌株
克魯斯假絲酵母培養(yǎng),ATCC菌株
綠色鏈霉菌保存,ATCC菌株
紫色鏈霉菌售價(jià),ATCC菌株
地生翅孢殼現(xiàn)貨,ATCC菌株
奇異翅孢殼培養(yǎng),ATCC菌株
束狀刺盤孢保存,ATCC菌株
多主枝孢售價(jià),ATCC菌株
熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 1 (HSF1)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子受體超家族成員8(TNFRSF8)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 8 (TNFRSF8)規(guī)格:48T/96T
激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)ELISA Kit for Protein Inhibitor Of Activated STAT 1 (PIAS1)規(guī)格:48T/96T
β-血小板球蛋白(βTG)ELISA Kit for Beta-Thromboglobulin (bTG)規(guī)格:48T/96T
載蛋白B48(APOB48)ELISA Kit for Apolipoprotein B48 (APOB48)規(guī)格:48T/96T
白介素1α(IL1α)ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a)規(guī)格:48T/96T
組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)ELISA Kit for Latent Transforming Growth Factor Beta Binding Protein 2 (LTBP2)規(guī)格:48T/96T
TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子2(TAF2)ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 2 (TAF2)規(guī)格:48T/96T
V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA Kit for V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS)規(guī)格:48T/96T
表皮生長因子受體(EGFR)ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR)規(guī)格:48T/96T
C-型鈉尿肽(CNP)ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP)規(guī)格:48T/96T
干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA Kit for Stem Cell Factor Receptor (SCFR)規(guī)格:48T/96T
表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體Baohuoside II中文名:別名:Ikarisoside A分子式:C26H28O10
Bax相互作用因子1抗體Blumeatin中文名:別名:分子式:C16H14O6
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體Ombuin中文名:商陸素別名:商陸黃素; Ombuine分子式:C17H14O7
BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體7,4'-Dihydroxy-3'-prenylflavan中文名:別名:分子式:C20H22O3
BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體Kaempferol 7-O-rhamnoside中文名:山奈酚-7-O-鼠李糖苷別名:分子式:C21H20O10
Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體 Penicillium expansum種屬:Penicillium expansum
分離基物:水果
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:麥芽膏瓊脂:麥芽膏 20.0g,瓊脂 20.0g,自來水 1.0L,自然pH。121℃,15min。
生長條件:25℃,好氧
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法擴(kuò)展青霉(斜面)
關(guān)鍵字: Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體 ;Anti-Collagen I/COL1;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;