抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BCAT2/BCAM
中文名稱 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體
別 名 BCAM; BCAT 2; BCATM; BCT2; Branched chain aminotransferase 2, mitochondrial; ECA40; Placental protein 18; PP18.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 41kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BCAT2/BCAM
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
糙皮側(cè)耳、平菇現(xiàn)貨,ATCC菌株
雪白根霉培養(yǎng),ATCC菌株
爪哇根霉保存,ATCC菌株
戴爾根霉售價(jià),ATCC菌株
根霉屬的菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
臺(tái)灣根霉培養(yǎng),ATCC菌株
科恩根霉保存,ATCC菌株
華根霉售價(jià),ATCC菌株
尼克酰腺嘌呤二核苷磷氧化酶1(NOX1)ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)規(guī)格:48T/96T
載蛋白B100(APOB100)ELISA Kit for Apolipoprotein B100 (APOB100)規(guī)格:48T/96T
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)規(guī)格:48T/96T
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7)規(guī)格:48T/96T
白介素7(IL7)ELISA Kit for Interleukin 7 (IL7)規(guī)格:48T/96T
抑制素βC(INHβC)ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)規(guī)格:48T/96T
10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)規(guī)格:48T/96T
纖維膠凝蛋白2(FCN2)ELISA Kit for Ficolin 2 (FCN2)規(guī)格:48T/96T
白介素35(IL35)ELISA Kit for Interleukin 35 (IL35)規(guī)格:48T/96T
肝X受體α(LXRα)ELISA Kit for Liver X Receptor Alpha (LXRa)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT3)ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體因子B(CFB)ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)規(guī)格:48T/96T
蛋白酪氨酸激酶ATK抗體7,3',4'-Trihydroxyflavone中文名:別名:分子式:C15H10O5
磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體2,3-Dihydroamentoflavone 7,4'-dimethyl ether中文名:2,3-二氫穗花杉雙黃酮-7,4'-二甲醚別名:分子式:C32H24O10
Bcl-10抗體Oroxylin A中文名:千層紙素A別名:分子式:C16H12O5
原癌基因Bcl-6抗體Puerarin中文名:葛根素別名:分子式:C21H20O9
磷酸化Bcl-10抗體Honyucitrin中文名:別名:分子式:C25H26O5
支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體 Agarivorans albus種屬:Agarivorans albus
分離基物:海藻
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:該菌株分泌產(chǎn)生瓊膠酶,瓊膠酶可降解瓊脂為瓊膠寡糖,瓊膠寡糖具有較高的生物活性如抗氧化,抗炎,抗癌以及益生元等作用。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:細(xì)菌用海洋液體培養(yǎng)基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,F(xiàn)e(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸餾水 1.0L,pH7.6。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:28℃,好氧
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法白色食藻菌
關(guān)鍵字: 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體 ;Anti-BCAT2/BCAM;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;