抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APPL1
中文名稱 銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體
別 名 Adapter protein containing PH domain; Adaptor Protein Containing pH Domain; Adaptor protein containing pH domain PTB domain and leucine zipper motif 1; Adaptor protein containing pH domain PTB domain and leucine zipper motif; AKT2 INTERACTOR; APPL 1; APPL1; DCC interacting protein 13 alpha; DCC-interacting protein 13-alpha; DIP 13 alpha; DIP13 alpha; Dip13-alpha; DIP13alpha; DP13A_HUMAN; KIAA1428; PTB domain and leucine zipper motif 1; PTB Domain and Leucine Zipper Motif; Signaling adaptor protein DIP13alpha.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 80kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APPL1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
解纖維芽孢桿菌 Bacillus cellulosilyticus
美人魚發(fā)光桿菌 Photobacterium damselae
食五環(huán)芳烴新鞘氨醇菌 Novosphingobium pentaromativorans
溝鞭藻赫夫勒氏菌 Hoeflea alexandrii
運(yùn)動(dòng)替斯崔納菌 Tistrella mobilis
海泥鼠尾菌 Muricauda lutimaris
需鹽色鹽桿菌 Chromohalobacter salexigens
站前喜鹽芽孢桿菌 Halobacillus yeomjeoni
紡錘形賴氨酸芽孢桿菌 Lysinibacillus fusiformis
藤黃紫假交替單胞菌 Pseudoalteromonas luteoviolacea
性磷酶1(ACP1)ELISA Kit for Acid Phosphatase 1 (ACP1)規(guī)格:48T/96T
趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1 (CX3CR1)規(guī)格:48T/96T
干擾素β(IFNβ)ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb)規(guī)格:48T/96T
干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF1)ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 1 (IRF1)規(guī)格:48T/96T
白介素10(IL10)ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6)規(guī)格:48T/96T
抗神經(jīng)節(jié)苷M1抗體(Anti-GM1)ELISA Kit for Anti-Ganglioside M1 Antibody (Anti-GM1)規(guī)格:48T/96T
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA Kit for Calreticulin (CRT)規(guī)格:48T/96T
腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM)規(guī)格:48T/96T
多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA Kit for Dopamine Transporter (DAT)規(guī)格:48T/96T
CD163分子(CD163)ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)規(guī)格:48T/96T
AHNAK核蛋白2抗體Pseudopalmatine中文名:別名:分子式:C21H22NO4
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體α-Yohimbine中文名:別名:分子式:C21H26N2O3
腺苷酸激酶1抗體Picrasidine J中文名:別名:8-Hydroxycrenatine分子式:C14H14N2O2
精子頂體前體蛋白抗體Dehydroaglaiastatin中文名:別名:分子式:C31H28N2O6
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體Methyl 3-indolecarboxylate中文名:別名:分子式:C10H9NO2
銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體 Lactobacillus│plantarum subsp. plantarum種屬:Lactobacillus│plantarum subsp. plantarum
分離基物:天津普羅比公司產(chǎn)品299V
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:生產(chǎn)活菌制劑,腸道益生菌。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0083
生長條件:37℃
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法植物乳桿菌植物亞種