抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-β-arrestin/ARRB2
中文名稱 β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2抗體
別 名 Beta-arrestin 2; Beta Arrestin 2; ARB 2; Beta arrestin 2; ARB2; ARR 2; ARR2; ARRB 2; ARRB2; Arrestin 3; Arrestin beta 2; BARR2; DKFZp686L0365; HGNC:712.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素 激酶和磷酸酶 通道蛋白 細(xì)胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Beta-arrestin 2 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
諾爾斯氏鏈霉菌 StreptomycesnourseiBrawnetal.
刺孢吸水鏈霉菌北京變種 Streptomyceshygrospinocusvar.beijingensisTaoetal.
淺灰鏈霉菌杭州變種 “Streptomycesgriseolusvar.hangzhouensis”YanandFang
熏衣草灰鏈霉菌 Streptomyceslavenduligriseus(Loccietal.1969)WittandStackebrandt
沙門氏菌IV SalmonellaSP.
粟褐芽孢桿菌 Bacillusbadius
肉葡萄球菌 Staphylococcuscarnosus
海濱芽孢桿菌 Bacilluslitoralis
巴氏葡萄球菌 Staphylococcuspasteuri
調(diào)料葡萄球菌 Staphylococcuscondimenti
膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)規(guī)格:48T/96T
精?;拿?RNPEP)ELISA Kit for Arginyl Aminopeptidase (RNPEP)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2)規(guī)格:48T/96T
磷烯醇式羧激酶1(PCK1)ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)規(guī)格:48T/96T
多巴受體D2(DRD2)ELISA Kit for Dopamine Receptor D2 (DRD2)規(guī)格:48T/96T
鞘磷(SPH)ELISA Kit for Sphingomyelin (SPH)規(guī)格:48T/96T
酪羥化酶(TH)ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)規(guī)格:48T/96T
Podocin蛋白(PDCN)ELISA Kit for Podocin (PDCN)規(guī)格:48T/96T
絲切蛋白1(CFL1)ELISA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1)規(guī)格:48T/96T
激活素A受體Ⅰ(ACVR1)ELISA Kit for Activin A Receptor Type I (ACVR1)規(guī)格:48T/96T
肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)ELISA Kit for Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC)規(guī)格:48T/96T
鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體Koumine N-oxide中文名:別名:分子式:C20H22N2O2
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體Alstolenine中文名:別名:分子式:C31H34N2O7
早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體Mallorepine中文名:別名:分子式:C7H6N2O
肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體Rauvotetraphylline D中文名:別名:分子式:C24H26N2O3
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β)Peraksine中文名:別名:分子式:C19H22N2O2
β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2抗體 Schizosaccharomyces│pombe種屬:Schizosaccharomyces│pombe
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:降解L-蘋果酸
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0181
生長條件:24℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法粟酒裂殖酵母