抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-ASIC1/BNaC2/ASIC1A
中文名稱 酸敏感離子通道1抗體
別 名 Acid-sensing ion channel 1; ASICs1; Acid sensing ion channel 1; Acid sensing ion channel 1a protein; Acid sensing ion channel; AI843610; Amiloride sensitive cation channel 2 neuronal; ASIC; ASIC1; ASIC1A; B530003N02Rik; BNAC2; Brain sodium channel 2; Cation channel amiloride sensitive neuronal 2; hBNaC2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 58kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASIC1 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是酸敏感離子通道1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種 Bacillusthuringiensissubsp.Sotto
蘇云金芽孢桿菌戈爾斯德變種 Bacillusthuringiensisvar.kurstakideBarjacetBonnefoi
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種 Bacillusthuringiensissubsp.galleriaeHeimpel
枯草芽孢桿菌深黑變種 BacillussubtilisVar.aterrimus(LehmannetNeumann)Smithetal.
嗜熱肪芽孢桿菌 BacillusstearothermophilusDonk
日本根霉 RhizopusjaponicusVuillemin
臺灣根霉 RhizopusformosensisNakazawa
裂褶菌 Schizophyllum commune Fr.
醋酸菌 Acetobacter sp.
蘇云金芽孢桿菌 BacillusthuringiensisBerliner
膽鹽乳瓊培養(yǎng)基250克DHL Agar沙門氏菌和志賀氏菌的分離培養(yǎng)
慶大霉素瓊250克Gentamycin Agar用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)
抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)250克Antibiotic Agar NO.1磺卞素等的效價測定
抗生素1號培養(yǎng)基(PH7.8.0)250克Antibiotic Agar NO.1鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、克拉霉素、妥布霉素、阿米卡星紅霉素、阿奇霉素等效價測定
抗生素3號培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.3藤黃八疊球菌懸液的制備
抗生素4號培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.4兩性霉素B等的效價測定
MH瓊250克MHA抗菌素藥物敏感性試驗
MH肉湯250克MHB用于抗菌素藥物敏感性試驗
抗生素2號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)250克Antibiotic Agar NO.2四環(huán)素、土霉素等的效價測定
抗生素2號培養(yǎng)基(PH7.8.0)250克Antibiotic Agar NO.2克林霉素、林可霉素等的效價測定
抗生素5號培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價測定
抗生素6號培養(yǎng)基250克Antibiotic Agar NO.6黏菌素等的效價測定
釉基質(zhì)蛋白抗體Ectoine中文名:四氫嘧啶別名:分子式:C6H10N2O2
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體Veratramine中文名:藜蘆胺別名:分子式:C27H39NO2
磷酸化雄激素受體抗體Nicotinic acid中文名:別名:分子式:C6H5NO2
錨定蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體Norchelerythrine中文名:去甲基白屈菜紅堿別名:去甲白屈菜紅堿分子式:C20H15NO4
膜粘連蛋白11抗體Aspyridone A中文名:別名:分子式:C19H23NO4
酸敏感離子通道1抗體 RhizopusnigricansEhrenberg種屬:RhizopusnigricansEhrenberg
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:17
生長條件:25-28℃黑根霉
關(guān)鍵字: 酸敏感離子通道1抗體 ;Anti-ASIC1/BNaC2/ASI;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;