抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ACADL
中文名稱 ?;o酶A脫氫酶長鏈抗體
別 名 mitochondrial; ACAD4; ACADL; ACADL_HUMAN; Acyl Coenzyme A dehydrogenase long chain; FLJ94052; LCAD; Long chain acyl CoA dehydrogenase; Long-chain specific acyl-CoA dehydrogenase.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACADL
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是?;o酶A脫氫酶長鏈抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
棉鈴蟲擬 Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith
皮狀絲孢酵母 Trichosporoncutaneum(deBeurmetal.)Ota
貝雷絲孢酵母 TrichosporonbehrendiiLodderetKreger-vanRij
玫煙色擬 Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith
露濕漆斑菌 MyrotheciumroridumTode:Fries
黑球漆斑菌 MyrotheciummelanosporumChen
五通橋毛霉 MucorwutungkiaoFang
產(chǎn)黃纖維單胞菌 Cellulomonas flavigena(Kellerman et McBeth) Bergry et al.
球型芽孢桿菌 BacillussphaericusMeyeretNeide
嗜水氣單胞菌 Aeromonas hydrophila (chester) Stanier
亮綠瓊培養(yǎng)基250克Brilliant Green Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)
梭菌培養(yǎng)基250克Clostridium Enrichment Medium用于梭菌增菌培養(yǎng)
安德雷德氏糖類肉湯250克Andrade,s Carbohydrate Broth細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗
OF培養(yǎng)基250克HLGB細(xì)菌的氧化發(fā)酵試驗
強(qiáng)化梭菌鑒別瓊250克DRCA食品和其他物質(zhì)中梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基250克RCM梭菌的增菌培養(yǎng)和計數(shù)
哥倫比亞瓊培養(yǎng)基250克Columbia Agar Medium營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)基及溶血試驗,梭菌的檢測
哥倫比亞4-基傘形葡糖苷培養(yǎng)基250克Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測
EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ)250克Egg Yolk Agar Medium Base肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)
250克蠟樣芽孢桿菌動力試驗
TBB培養(yǎng)基250克Tybobutyricum Broth Base乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)
SCHAEDLER厭氧菌瓊250克SCHAEDLER Agar厭氧菌的分離培養(yǎng)
肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Tyramine hydrochloride中文名:酪胺鹽酸鹽別名:分子式:C8H12NO
磷酸化CD156b抗體Trolline中文名:金蓮花堿別名:(±)-Trolline分子式:C12H13NO3
乙醇脫氫酶5抗體5-Carboxystrictosidine中文名:別名:(5S)-5-Carboxystrictosidine分子式:C28H34N2O11
乙醇脫氫酶6抗體4,5-Dihydropiperlonguminine中文名:二氫蓽茇明寧堿別名:Dihydropiperlonguminine分子式:C16H21NO3
遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體14-O-Acetylneoline中文名:14-O-乙?;釆W寧別名:14-Acetylneoline; Bullatine C分子式:C26H41NO7
?;o酶A脫氫酶長鏈抗體 AspergillusauratusWarcup種屬:AspergillusauratusWarcup
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:13
生長條件:25-28℃鮮橙曲霉