"KM12細胞：人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
如何進行細胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
K7M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
MDCK II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞
HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
TE671/RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
BE(2)M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細胞、OLN 93細胞、LLC-MK2細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、OC-3-VGH細胞、SHG 44細胞
INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL1細胞、SCL-2細胞、SV-HUC細胞
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、MES-SA/Dx5細胞、EC109細胞
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