"KM12 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KM12 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
SuDHL 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
細胞生長特性:貼壁生長
KM12 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
KM12 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
UMUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
C38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
WEHI231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
ECC 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
KM12 Cell:人結(jié)腸癌細胞系
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、HUCEC細胞、SW-1783細胞
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