"HEK293-EBNA細(xì)胞：人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４-１：１０傳代；每周２次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞
CTLA4 Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞
WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞
MCF-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞
PK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
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Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
Farage細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
MDA MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、293 F細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞
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