"HEK293-EBNA epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質,對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 MDA-MB157細胞系相關產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞 U-343 MG細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞 細胞生長:貼壁 HEK293-EBNA epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2次。 NFS-60細胞系相關產(chǎn)品:Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞 SK-NM-C細胞系相關產(chǎn)品:HUVSMC細胞、WM 2664細胞、SO-Rb 50細胞 N-9細胞系相關產(chǎn)品:PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞 NCI-H157細胞系相關產(chǎn)品:Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞 SK-N-BE2C細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HEK293-EBNA epithelioid cells人胚腎細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞 Human Microglia Clone 3細胞系相關產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞 SU-DHL2細胞系相關產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞 DU_145細胞系相關產(chǎn)品:ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞 OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞 RGC-5細胞系相關產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 ACC2細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞 HPAEC細胞系相關產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞 NPC-TW 039細胞系相關產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞 HEK293-EBNA epithelioid cells人胚腎細胞系 KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞 NF639細胞系相關產(chǎn)品:MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞 OCI Ly3細胞系相關產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞 aNK細胞系相關產(chǎn)品:OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞 Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞 PLC/PRF/5細胞系相關產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞 PLC/PRF/5細胞系相關產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞 MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞 Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞 ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 MOLT 4細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞 Hep II細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞 H2141細胞系相關產(chǎn)品:Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞 PCI:SG-231細胞系相關產(chǎn)品:SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞 HCT-FET細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞 IMR 32細胞系相關產(chǎn)品:RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞 SCH細胞系相關產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 639 V細胞系相關產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞 COLO 738細胞系相關產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞 LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞 F9細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞 NTERA2D1細胞系相關產(chǎn)品:MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞 NCI-H2286細胞系相關產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞 M2-10B4細胞系相關產(chǎn)品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞 SW954細胞系相關產(chǎn)品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞 H1693細胞系相關產(chǎn)品:PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞 MDA157細胞系相關產(chǎn)品:Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞 UMC11細胞系相關產(chǎn)品:U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞 CAL 62細胞系相關產(chǎn)品:NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞 NU-GC-3細胞系相關產(chǎn)品:MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞 DOK細胞系相關產(chǎn)品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞 OSC-19細胞系相關產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞 MAVER細胞系相關產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞 EMT-6細胞系相關產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞 KBM-5細胞系相關產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 AN-3細胞系相關產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞 GA-10細胞系相關產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞 H64細胞系相關產(chǎn)品:EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞 P30OHK細胞系相關產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞 ARPE-19細胞系相關產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞 P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞 MOLP-8細胞系相關產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞 P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞 Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關產(chǎn)品:OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞 TE-8細胞系相關產(chǎn)品:Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞 H2052細胞系相關產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞 MiaPaCa2細胞系相關產(chǎn)品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞 578T細胞系相關產(chǎn)品:ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞 HEK293-EBNA epithelioid cells人胚腎細胞系 RPTEC TERT1細胞系相關產(chǎn)品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞 SF-539細胞系相關產(chǎn)品:SCCVII細胞、COLO206細胞、373MG細胞 B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、WB-F344細胞、ATC241細胞 NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品:74Int細胞、L540細胞、L 363細胞 "
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