"NCI-H1395細胞：人非小細胞肺癌細胞系

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２傳代；５-６天傳代一次。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

細胞生長特性：貼壁生長

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。

NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞

COV 504細胞系相關產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞

P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞

SW-837細胞系相關產(chǎn)品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞

R1800[RA]細胞系相關產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞

NTera 2/cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞

OV-CA 432細胞系相關產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞

NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞

WRL-68細胞系相關產(chǎn)品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞

H2227細胞系相關產(chǎn)品：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞

SUM149細胞系相關產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞

138MG細胞系相關產(chǎn)品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞

NCI-H69細胞系相關產(chǎn)品：H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞

ARH-77細胞系相關產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞

FK81細胞系相關產(chǎn)品：TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞

CBRH7919細胞系相關產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

CBRH7919細胞系相關產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

KBM7細胞系相關產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞

NCI H508細胞系相關產(chǎn)品：NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞

HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞

CCD1095Sk細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞

MDA-MB-435 S細胞系相關產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞

RMS13細胞系相關產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞

U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞

UT-7細胞系相關產(chǎn)品：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞

OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞

ATN1細胞系相關產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞

HEK 293FT細胞系相關產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞

HPAEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞

Eca 109細胞系相關產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞

P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞

RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞

B-cell with DC Morphology細胞系相關產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞

TOG細胞系相關產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞

Tregs細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞

624mel細胞系相關產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞

HIT T15細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞

NGEC細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞

LCMS細胞系相關產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞

U-373MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞

MCF.7細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞

BHK 21細胞系相關產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞

Daudi細胞系相關產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞

PANC-08-13細胞系相關產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞

BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞

AMC-HN-8細胞系相關產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞

KPL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞

NCI-H209細胞系相關產(chǎn)品：RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞

OVCAR8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞

Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞

Pa14C細胞系相關產(chǎn)品：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞

BALL-1細胞系相關產(chǎn)品：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞

COR-L 105細胞系相關產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞

alphaTC clone 6細胞系相關產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞

M-07e細胞系相關產(chǎn)品：KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞

TK 10細胞系相關產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞

B958細胞系相關產(chǎn)品：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞

OCI/AML-3細胞系相關產(chǎn)品：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

SK-MEL-1細胞系相關產(chǎn)品：BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞

SK MES 1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞

VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞

KTCTL140細胞系相關產(chǎn)品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞

H-661細胞系相關產(chǎn)品：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞

SK-OV-433細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞

PC 12細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞

FAO-1細胞系相關產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞

HCC366細胞系相關產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞

B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞

MGC-803細胞系相關產(chǎn)品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞

Bowes melanoma cells細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1187細胞、P3X63 Ag8細胞、MV-3細胞

OVCA 433細胞系相關產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、MLE-12細胞、BIU87細胞

P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 30細胞、KNS81細胞、SCaBER細胞

HLFa細胞系相關產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、BT483細胞、WEHI 164 TC細胞

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