"NCI-H1395 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞 MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞 L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H1395 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;5-6天傳代一次。 NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞 NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞 Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H1395 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形 常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞 MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞 OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞 S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞 UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞 A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞 RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞 NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞 BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞 SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞 NCI-H1395 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞 Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞 OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞 OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞 NK 10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞 BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞 BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞 CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞 H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞 B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞 NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞 Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞 Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞 H-295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞、UCH1細(xì)胞 PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞 HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞 PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞 OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞 NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞 EBNA293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞 MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞 HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞 HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞 SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞 NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞 MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞 MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞 CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞 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Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞 NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞 FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞 P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞 JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞 RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞 HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞 NS20-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞、FM-88細(xì)胞 ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞 LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞 NCI-H1395 epithelioid cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞 HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞 DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、HKBML細(xì)胞 OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 "
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