"G-402細胞：人腎平滑肌瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：６傳代，每周２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
SKOV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
OCI Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、MCF10A細胞、B16F1細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞、TE 354.T細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、HMEC1細胞、Detroit562細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、NB19-RIKEN細胞、GM00637F細胞
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