"NCI-H520細胞：人肺腺鱗癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉移到預熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
mRMEC細胞系相關產(chǎn)品：A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
L cell細胞系相關產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
SUDHL-5細胞系相關產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
HDLM-2細胞系相關產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
USMC細胞系相關產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
PLA801-95D細胞系相關產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
HCE-T細胞系相關產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
NPC-039細胞系相關產(chǎn)品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
DV-90細胞系相關產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
COR-L105細胞系相關產(chǎn)品：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
U-118MG細胞系相關產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
OCI Ly10細胞系相關產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
CCFSTTG1細胞系相關產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
ANA-1細胞系相關產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
L-M[TK-]細胞系相關產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
CEM細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
SK-Mel1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
L5178Y細胞系相關產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
A2058細胞系相關產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
MCM細胞系相關產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
R.K.13細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
Kato-III細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
EoL-1-cell細胞系相關產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
MLOY4細胞系相關產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
KMBC細胞系相關產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
801-D細胞系相關產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
Kasumi-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
MGHU1細胞系相關產(chǎn)品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品：RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
Karpas422細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCIH661細胞系相關產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
SkChA-1細胞系相關產(chǎn)品：CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
HCC-1599細胞系相關產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
32D-Cl3細胞系相關產(chǎn)品：FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
Mia PACA 2細胞系相關產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
SUP-B15細胞系相關產(chǎn)品：NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
IOSE-80細胞系相關產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
MBT2細胞系相關產(chǎn)品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
KP-N-NS細胞系相關產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
BPH1細胞系相關產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
VMM-5A細胞系相關產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
HLFa細胞系相關產(chǎn)品：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
NTera 2細胞系相關產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
RGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
ECV304細胞系相關產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
HIMEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
MDAMB435S細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
H-524細胞系相關產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
CCD-112CoN細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
LA4細胞系相關產(chǎn)品：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
SW-839細胞系相關產(chǎn)品：OCILY19細胞、NRCC細胞、Ketr-3細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、SNU398細胞、YH細胞
LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品：PANC0327細胞、H548細胞、OV433細胞
HCC9724細胞系相關產(chǎn)品：COLO680N細胞、T-47-D細胞、BTT739細胞
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