"BEL-7402細胞：人肝癌細胞系
細胞背景資料：BEL-７４０２細胞株是１９７４年從臨床肝癌手術(shù)標本中建立的。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
C38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞、WRL68細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
KBM7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
A-427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
GM 637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞
HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
Hep3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL19細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JKT-1細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、OCUM-1細胞、AN3-CA細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細胞、RTMC細胞、HBL-100細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、TE5細胞、MKN74細胞
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