"BEL-7402細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：BEL-７４０２細(xì)胞株是１９７４年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
接收細(xì)胞相關(guān)問(wèn)題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過(guò)夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
B16 subline B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
SUDHL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞
N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
OACP4 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞
PC-9S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
Tu686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細(xì)胞、SUM102細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞
SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
HeLa.S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ND7/23細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞
MDCK supertube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞
MDCK supertube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL19細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、TE5細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
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