"SNU-475細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同，有的生長(zhǎng)很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。

OE21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞

EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞

KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞

MEG-01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞

SR-786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞

526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞

NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞

NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞

SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞

MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞

CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞

TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞

EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞

SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞

UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞

SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞

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OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞

OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞

CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞

NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞

MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞

SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞

CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞

NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞

Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞

Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞

BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞

MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞

HSC（Human Schwann）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞

LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞

CX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH7777細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞、H-716細(xì)胞

T.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細(xì)胞、H1838細(xì)胞、KNS81細(xì)胞

KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞

SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞

Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞

624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞

ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞

KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞

TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞

H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞

MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞

MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞

MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞

BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞

HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞

T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞

Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞

OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞

LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞

Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞

SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞

MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞

C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞

Mink Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1915細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞

MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞

HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞

SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞

SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞

Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞

CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞

GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞

GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞

LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞

143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞

HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞

DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞

L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、SNU761細(xì)胞

KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞

HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、H-2135細(xì)胞

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