"SNU-475 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SNU-475 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
SNU-475 Cell:人肝癌細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
SNU-475 Cell:人肝癌細(xì)胞系
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
RK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
SNU-475 Cell:人肝癌細(xì)胞系
PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞、H-2087細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
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