"COLO 320HSR細胞：人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８４年建系，源自一位３３歲患有大腸腺癌男性經(jīng)５-fu治療后的腹水。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：半貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
T-47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、COLO-320細胞、Bovine Turbinate細胞
BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細胞、MDA-453細胞、NCI-H2196細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細胞、A9細胞、NCI-H378細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細胞、SK-N-BE-2細胞、MC-3T3細胞
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