"LS174T細(xì)胞：人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：LS １７４T是LS １８０ (ATCC CL １８７)結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS １８０一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細(xì)胞質(zhì)粘液素液泡。 直腸抗原３陽性。 p５３抗原表達(dá)陰性，但mRNA表達(dá)陽性。 與ATCC CL-１８７來源于同一個(gè)腫瘤。LS １７４T細(xì)胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達(dá)呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達(dá)未做檢測。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個(gè)T２５培養(yǎng)瓶中；２)細(xì)胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來進(jìn)行培養(yǎng)。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞
As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞
FL-83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞
SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid細(xì)胞： No. 18細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial細(xì)胞：-19細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
NIH:OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
HSC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
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