"LS174T:人結直腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MKN-7細胞類似產(chǎn)品：：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞

NCIH1568細胞類似產(chǎn)品：：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞

P3/X63/Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞

Pa18C細胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：LS １７４T是LS １８０ (ATCC CL １８７)結腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS １８０一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細胞質粘液素液泡。 直腸抗原３陽性。 p５３抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。 與ATCC CL-１８７來源于同一個腫瘤。LS １７４T細胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。

LS174T:人結直腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

CCRF.CEM細胞類似產(chǎn)品：：OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞

SJSA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞

M109細胞類似產(chǎn)品：：JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

LS174T:人結直腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

HSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞

RKO細胞類似產(chǎn)品：：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞

RBL.2H3細胞類似產(chǎn)品：：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞

Panc327細胞類似產(chǎn)品：：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞

MUTZ3細胞類似產(chǎn)品：：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞

H766T細胞類似產(chǎn)品：：Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞

SCLC21H細胞類似產(chǎn)品：：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞

MC-26細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞

L-WRN細胞類似產(chǎn)品：：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞

H-1672細胞類似產(chǎn)品：：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞

130 T細胞類似產(chǎn)品：：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞

WM239A細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞

COLO 320 HSR細胞類似產(chǎn)品：：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞

MN-9D細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞

Hmy.2 CIR細胞類似產(chǎn)品：：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞

MKN28細胞類似產(chǎn)品：：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞

MKN28細胞類似產(chǎn)品：：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞

WM 266-4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

NL20細胞類似產(chǎn)品：：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞

MuM-2B細胞類似產(chǎn)品：：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞

REC1細胞類似產(chǎn)品：：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞

H-2108細胞類似產(chǎn)品：：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞

MKN28細胞類似產(chǎn)品：：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞

GM637細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞

LS174T:人結直腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

SK-HEP-1細胞類似產(chǎn)品：：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞

Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞類似產(chǎn)品：：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞

Epstein-Barr-1細胞類似產(chǎn)品：：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞

UPCISCC154細胞類似產(chǎn)品：：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞

MDA415細胞類似產(chǎn)品：：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞

SNU-638細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞

SKNAS細胞類似產(chǎn)品：：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞

HSC1細胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細胞、HLMVEC細胞、HT1376細胞

TM-3細胞類似產(chǎn)品：：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞

J 111細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞

TCC-SUP細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞

SHIN3細胞類似產(chǎn)品：：HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞

BCPAP細胞類似產(chǎn)品：：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞

2PK3細胞類似產(chǎn)品：：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞

BT-474細胞類似產(chǎn)品：：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞

HIMEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞

BTI-TN5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞

OCM1細胞類似產(chǎn)品：：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞

MC9細胞類似產(chǎn)品：：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞

NCI-H2342細胞類似產(chǎn)品：：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞

3T6 Swiss Albino細胞類似產(chǎn)品：：D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞

H-1703細胞類似產(chǎn)品：：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞

Ls-174-T細胞類似產(chǎn)品：：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞

CHP-126細胞類似產(chǎn)品：：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞

HT29細胞類似產(chǎn)品：：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞

PIG1細胞類似產(chǎn)品：：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞

COR-L105細胞類似產(chǎn)品：：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞

KM12-SM細胞類似產(chǎn)品：：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞

MC26細胞類似產(chǎn)品：：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞

KCL-22細胞類似產(chǎn)品：：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞

UMUC14細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞

PANC-28細胞類似產(chǎn)品：：CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞

HCC0827細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞

TC-1 [Mouse lung]細胞類似產(chǎn)品：：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-FGC細胞、KYSE410細胞、Colo320細胞

IPI-2I細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細胞、WiDr-TC細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞

RBL.2H3細胞類似產(chǎn)品：：BT20細胞、J774A.1細胞、SF17細胞

MPC-11細胞類似產(chǎn)品：：U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞

CHP100細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞

HLFa細胞類似產(chǎn)品：：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞

WSU-HN13細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞

HCC-2279細胞類似產(chǎn)品：：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞

JKT-1細胞類似產(chǎn)品：：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

WEHI-3細胞類似產(chǎn)品：：BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞

3-LL細胞類似產(chǎn)品：：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞

H7721細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞

Hs 839.T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞

ECV304細胞類似產(chǎn)品：：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞

SKOV3細胞類似產(chǎn)品：：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞

BRL 3A細胞類似產(chǎn)品：：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞

WM 266-4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞

RH-30細胞類似產(chǎn)品：：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

Hs 888Lu細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞

Lewis lung carcinoma細胞類似產(chǎn)品：：Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞

T47-D細胞類似產(chǎn)品：：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞

MN9D細胞類似產(chǎn)品：：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞

MN9D細胞類似產(chǎn)品：：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞

NK62a細胞類似產(chǎn)品：：OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞

LAD 2細胞類似產(chǎn)品：：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞

J 774A.1細胞類似產(chǎn)品：：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

DHL8細胞類似產(chǎn)品：：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞

293EBNA細胞類似產(chǎn)品：：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞

FLS細胞類似產(chǎn)品：：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞

RPMI no. 8226細胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

AR-42J細胞類似產(chǎn)品：：SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞

SNU668細胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞

ECC-10細胞類似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞

P-388D1細胞類似產(chǎn)品：：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞

NS-1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞

HS-766T細胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

675T細胞類似產(chǎn)品：：L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞

ANA1細胞類似產(chǎn)品：：C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞

LCLC-103H細胞類似產(chǎn)品：：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞

AN-3細胞類似產(chǎn)品：：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞

PL5細胞類似產(chǎn)品：：PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞

H9c2 (2-1)細胞類似產(chǎn)品：：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞

My-La 2059細胞類似產(chǎn)品：：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞

A-498細胞類似產(chǎn)品：：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞

Tu 177細胞類似產(chǎn)品：：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞

WM115mel細胞類似產(chǎn)品：：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞

LS174T:人結直腸腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HS0578T細胞類似產(chǎn)品：：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞

TE6細胞類似產(chǎn)品：：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞

Wayne State University-Head and Neck 13細胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞

PC3M-2B4細胞類似產(chǎn)品：：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞

NCIH441細胞類似產(chǎn)品：：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞

TF-1細胞類似產(chǎn)品：：Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞

"