"PK136 小鼠B淋巴瘤X小鼠骨髓瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細胞生長：懸浮 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
PK136 小鼠B淋巴瘤X小鼠骨髓瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
PK136 小鼠B淋巴瘤X小鼠骨髓瘤細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
H1993細胞系相關產(chǎn)品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞 
aTC1-6細胞系相關產(chǎn)品：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞 
HPAF2細胞系相關產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞 
HT115細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞 
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞 
Hs839.T細胞系相關產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞 
EFM192B細胞系相關產(chǎn)品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞 
COLO-320-DM細胞系相關產(chǎn)品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞 
H2135細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞 
PL11細胞系相關產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞 
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞 
ABE­8.1/2細胞系相關產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞 
DU4475細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞 
A10細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞 
RenCa細胞系相關產(chǎn)品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 
RenCa細胞系相關產(chǎn)品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 
DU 145細胞系相關產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞 
HIT clone T15細胞系相關產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞 
NCI-H1155細胞系相關產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞 
PK136 小鼠B淋巴瘤X小鼠骨髓瘤細胞系
Jurkat E6.1細胞系相關產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞 
U373MG細胞系相關產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞 
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞 
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞 
IPI-2I細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞 
EA.hy 926細胞系相關產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞 
SK-MES1細胞系相關產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞 
MZ-CRC-1細胞系相關產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞 
Hep G2-Luc細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞 
H2009細胞系相關產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞 
HEC1A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞 
RCC23細胞系相關產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞 
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞 
KCL22細胞系相關產(chǎn)品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞 
MEL-526細胞系相關產(chǎn)品：Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞 
NP-69細胞系相關產(chǎn)品：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞 
BALL-1細胞系相關產(chǎn)品：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞 
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 
Colo-201細胞系相關產(chǎn)品：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞 
KYSE-150細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞 
BERH-2細胞系相關產(chǎn)品：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞 
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞 
SUM-52-PE細胞系相關產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞 
CCC-HEH-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞 
SW 780細胞系相關產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 
87MG細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞 
RPPVEC細胞系相關產(chǎn)品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞 
H-1793細胞系相關產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞 
Panc4.03細胞系相關產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 
Hep 3B2細胞系相關產(chǎn)品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞 
NCI-H735細胞系相關產(chǎn)品：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞 
PCI-04B細胞系相關產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞 
L 132細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 
DU-4475細胞系相關產(chǎn)品：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞 
293c18細胞系相關產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞 
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 
G 292 Clone A 141B1細胞系相關產(chǎn)品：T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞 
TALL-104細胞系相關產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞 
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞 
SK-ChA1細胞系相關產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞 
PK136 小鼠B淋巴瘤X小鼠骨髓瘤細胞系
U266B1細胞系相關產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞 
IM-9細胞系相關產(chǎn)品：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞 
D283 Med細胞系相關產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞 
GP2d細胞系相關產(chǎn)品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞 
WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞 
HCC-2185細胞系相關產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞 
2E8細胞系相關產(chǎn)品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞 
Reuber H35細胞系相關產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞 
N1S1細胞系相關產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞 
TC7細胞系相關產(chǎn)品：KMBC細胞、WRL 68細胞、M14細胞 
RenCa細胞系相關產(chǎn)品：NIE 115細胞、BEL 7402細胞、High-5細胞 
HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MUS-M1細胞、U-87-MG細胞、CEMx721.174.T2細胞 
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