"Raji 人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：Raji細胞由PulvertaftRJV于１９６３年從一位１１歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞，為B細胞起源。該細胞中含有EBV，需要在二級生物安全柜中操作；可作轉染宿主。 
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣 
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產(chǎn)生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細胞生長：懸浮 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
Raji 人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：維持細胞濃度在４×１０５/ml-３×１０６/ml；根據(jù)細胞濃度每２-３天補液１次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：懸浮生長 
Raji 人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣 
ECC 12細胞系相關產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞 
HOP-92細胞系相關產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞 
Scott and White No. 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 
GM2131細胞系相關產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞 
OSC19細胞系相關產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞 
RL952細胞系相關產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞 
PT-67細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 
OCILY7細胞系相關產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞 
NB-19細胞系相關產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞 
RT112細胞系相關產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 
PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞 
PVEC細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞 
LNCaP.FGC細胞系相關產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞 
T-ALL-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 
A-673細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞 
Hu-P-T3細胞系相關產(chǎn)品：OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 
Hu-P-T3細胞系相關產(chǎn)品：OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 
U-937細胞系相關產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞 
Caki2細胞系相關產(chǎn)品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞 
BHK細胞系相關產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 
Raji 人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
KM.12細胞系相關產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞 
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞 
BC3H1細胞系相關產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞 
EBC-1細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞 
He La細胞系相關產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞 
W133細胞系相關產(chǎn)品：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞 
F-81細胞系相關產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞 
MDA 435細胞系相關產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞 
SUM149-PT細胞系相關產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞 
EFO-27細胞系相關產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞 
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞 
H-2110細胞系相關產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞 
HS-766T細胞系相關產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞 
IEC-18細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞 
Kit 225-K6細胞系相關產(chǎn)品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞 
SK.MEL.28細胞系相關產(chǎn)品：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞 
HMVEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 
52PE細胞系相關產(chǎn)品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞 
He La細胞系相關產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞 
S16細胞系相關產(chǎn)品：MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞 
Kuramochi細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞 
Med 341細胞系相關產(chǎn)品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞 
PLCPRF5細胞系相關產(chǎn)品：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞 
McARH7777細胞系相關產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞 
MCA-38細胞系相關產(chǎn)品：MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞 
H1836細胞系相關產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞 
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞 
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞 
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關產(chǎn)品：H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞 
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞 
Hs940T細胞系相關產(chǎn)品：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 
Rat1細胞系相關產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞 
P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 
293AD細胞系相關產(chǎn)品：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞 
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關產(chǎn)品：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞 
Namalva細胞系相關產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞 
MDA-435細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞 
SF17細胞系相關產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞 
RIN Cl-5F細胞系相關產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞 
MGH-U3 (RN)細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞 
Raji 人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
HCT/FU細胞系相關產(chǎn)品：Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞 
MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞 
OVCAR8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞 
SK MES 1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞 
Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞 
CBRH7919細胞系相關產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞 
CHO K1細胞系相關產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞 
HuH-6細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞 
BT-483細胞系相關產(chǎn)品：C8161細胞、JIII細胞、M109細胞 
TE 671細胞系相關產(chǎn)品：SCC15細胞、EBC-1/original細胞、HPAEpiC細胞 
Scott and White No. 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H735細胞、HRC-99細胞、T-HEECs細胞 
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