"Raji細(xì)胞：人Burkitt’s淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：Raji細(xì)胞由PulvertaftRJV于１９６３年從一位１１歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是個(gè)人類(lèi)造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細(xì)胞，為B細(xì)胞起源。該細(xì)胞中含有EBV，需要在二級(jí)生物安全柜中操作；可作轉(zhuǎn)染宿主。
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：維持細(xì)胞濃度在４×１０５/ml-３×１０６/ml；根據(jù)細(xì)胞濃度每２-３天補(bǔ)液１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋?zhuān)玻氨稌r(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線(xiàn)繩，通過(guò)線(xiàn)繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂；細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)，是否應(yīng)馬上去除DMSO？除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感之細(xì)胞外，絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞），在解凍之后，應(yīng)直接放入含有１０-１５ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活；培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用５%或１０%CO２？或根本沒(méi)有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO３的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO２濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO３含量為每公升３.７g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用１０%CO２；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO３為每公升１.５g時(shí)，則應(yīng)使用５%CO２培養(yǎng)細(xì)胞。何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？除于特殊篩選系統(tǒng)中外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞
SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞
DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
NCIH820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
C-33 A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、H1563細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、TOG細(xì)胞、H2444細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
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