"NB1RGB 人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：皮膚；成纖維細(xì)胞；男性 
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強(qiáng)：實驗進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NB1RGB 人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁 
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細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞 
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞 
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞 
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞 
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞 
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞 
LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞 
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞 
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞 
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞 
PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞 
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞 
Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞 
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞 
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞 
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞 
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞 
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞 
NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞 
SUM-190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1355細(xì)胞、FL62891細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞 
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MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞 
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞 
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞 
Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞 
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞 
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞 
Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞 
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞 
NCIH1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞 
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞 
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞 
Adeno-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞 
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞 
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞 
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞 
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞 
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞 
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞 
CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞 
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞 
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞 
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞 
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞 
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞 
NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞 
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞 
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞 
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞 
KALS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞 
MDA MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞 
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞 
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞 
HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞 
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞 
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞 
MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞 
NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞 
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞 
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞 
NB1RGB 人皮膚成纖維細(xì)胞系
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞 
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞 
SW 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞 
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞 
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞 
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞 
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞 
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞 
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞 
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、L132細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞 
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞 
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞 
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