"NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：皮膚；成纖維細(xì)胞；男性
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話(huà)，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
TFH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠(chǎng)商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶(hù)收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞
MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞
IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
BIU-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
NB9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451細(xì)胞、A-9細(xì)胞、MPC11細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
RPPVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞
NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
NB1RGB fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系
TE-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞
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