"VP303 人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過(guò)火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時(shí)仍要過(guò)火。各種操作要靠近酒精燈，動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時(shí)要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來(lái)水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時(shí)以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時(shí)后立即用自來(lái)水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來(lái)水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來(lái)水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過(guò)３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開(kāi)開(kāi)關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時(shí)，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過(guò)的玻璃器皿可直接泡入來(lái)蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過(guò)來(lái)蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來(lái)水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
VP303 人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的，大家爭(zhēng)取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 
VP303 人乳腺癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開(kāi)細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi)，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái)，又不能太過(guò)，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開(kāi)。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來(lái)洗，洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開(kāi)來(lái)。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開(kāi)來(lái)的時(shí)候，就可以直接吹打下來(lái)，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過(guò)了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了，可以選用此方法。不過(guò)一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞 
KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞 
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞 
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞 
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞 
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞 
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞 
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞 
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞 
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞 
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞 
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞 
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞 
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞 
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞 
A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞 
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞 
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞 
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞 
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 
VP303 人乳腺癌細(xì)胞系
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞 
Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞 
IMR 90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞 
MDAMB175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、WM451細(xì)胞 
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞 
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞 
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞 
P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞 
TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞 
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞 
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞 
NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞 
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞 
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞 
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細(xì)胞、TI-73細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞 
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞 
N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞 
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞 
National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞 
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞 
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞 
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞 
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞 
RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞 
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞 
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞 
MonoMac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞 
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞 
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞 
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞 
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞 
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞 
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞 
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞 
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞 
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞 
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞 
HBL100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB985細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞 
P-388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-3細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞、HLF細(xì)胞 
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞 
VP303 人乳腺癌細(xì)胞系
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞 
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞 
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞 
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞 
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞 
MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞 
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞 
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞 
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞 
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞 
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞 
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