"VP267 人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
VP267 人乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
VP267 人乳腺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞 
HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞 
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞 
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞 
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞 
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞 
CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞 
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞 
H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞 
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞 
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞 
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞 
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞 
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞 
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞 
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞 
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞 
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DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞 
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞 
FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞 
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞 
118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞 
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞 
Hs863T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞 
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞 
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞 
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞 
KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞 
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞 
PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞 
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞 
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞 
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞 
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞 
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞 
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞 
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞 
TF-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞 
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞 
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞 
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞 
KASUMI6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞 
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞 
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞 
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞 
OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞 
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 
Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞 
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞 
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞 
SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞 
VP267 人乳腺癌細胞系
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞 
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞 
COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞 
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞 
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞 
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞 
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞 
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞 
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 
YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細胞、TGBC-11-TKB細胞、SW1116細胞 
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、YD-15細胞、L1210細胞 
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、SUM102細胞、C3H10T1/2 clone8細胞 
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