"LN-382 人腦膠質瘤細胞系
細胞背景資料：膠質瘤；男性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
LN-382 人腦膠質瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
LN-382 人腦膠質瘤細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
PASMCS細胞系相關產品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞 
Ra #1細胞系相關產品：PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞 
NCI-H719細胞系相關產品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞 
DHL5細胞系相關產品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞 
Capan 2細胞系相關產品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞 
SNK1細胞系相關產品：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞 
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞 
HCC4006細胞系相關產品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞 
Ball 1細胞系相關產品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞 
A-101D細胞系相關產品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞 
PC 61-5-3細胞系相關產品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞 
H-2073細胞系相關產品：Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞 
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關產品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞 
HKBML細胞系相關產品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞 
NCI N87細胞系相關產品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞 
BE2M17細胞系相關產品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 
BE2M17細胞系相關產品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 
Cor L51細胞系相關產品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞 
PANC-1細胞系相關產品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞 
AgC11x3A細胞系相關產品：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞 
LN-382 人腦膠質瘤細胞系
KMH2細胞系相關產品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞 
ECC-12細胞系相關產品：RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞 
BLO 11細胞系相關產品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞 
H-35細胞系相關產品：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞 
OVCAR 420細胞系相關產品：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 
QBC-939細胞系相關產品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞 
OCI-AML5細胞系相關產品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞 
H2342細胞系相關產品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞 
HRVEC細胞系相關產品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞 
P3-X63-Ag8.653細胞系相關產品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞 
293A細胞系相關產品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞 
NCI-H2195細胞系相關產品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 
SK-RC-20細胞系相關產品：CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞 
PAI細胞系相關產品：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞 
HS688AT細胞系相關產品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞 
MFE-280細胞系相關產品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞 
VMCUB1細胞系相關產品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞 
HEM細胞系相關產品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞 
A549ATCC細胞系相關產品：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞 
SJCRH30細胞系相關產品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞 
WERI細胞系相關產品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞 
6T-CEM細胞系相關產品：SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞 
Hs 729細胞系相關產品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞 
HT-1197細胞系相關產品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞 
SF 763細胞系相關產品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞 
U-2-OS細胞系相關產品：AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞 
NCI-H1703細胞系相關產品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞 
NCIH647細胞系相關產品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞 
H-522細胞系相關產品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞 
MIMVEC細胞系相關產品：A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞 
SK-ChA-1細胞系相關產品：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞 
MM-1S細胞系相關產品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞 
AZ 521細胞系相關產品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞 
5637細胞系相關產品：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞 
H-1563細胞系相關產品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞 
hFOB細胞系相關產品：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞 
HG2855細胞系相關產品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞 
PC-14細胞系相關產品：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞 
BNCL-2細胞系相關產品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞 
UCH1細胞系相關產品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞 
Neuro-2a細胞系相關產品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 
LN-382 人腦膠質瘤細胞系
hs 68細胞系相關產品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞 
H526細胞系相關產品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞 
IALM細胞系相關產品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 
ST486細胞系相關產品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞 
EAC-E2G8細胞系相關產品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞 
RCF細胞系相關產品：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 
NBL-4細胞系相關產品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞 
SP2-0-Ag14細胞系相關產品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞 
293T細胞系相關產品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞 
Caco-2 BBe細胞系相關產品：RPMI 6666細胞、CCC-ESF-1細胞、3T3 L1細胞 
JB6 [Mouse]細胞系相關產品：NRK49F細胞、NCI-SNU-182細胞、HARA-B細胞 
NCI-H719細胞系相關產品：Ca 9-22細胞、hEM15A細胞、HCC1954 BL細胞 
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