"HHUA 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：子宮內(nèi)膜癌；女性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
HHUA 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
HHUA 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞 
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞 
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞 
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞 
HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞 
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞 
CL 1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞 
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞 
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞 
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞 
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞 
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞 
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞 
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞 
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞 
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞 
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞 
HHUA 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞 
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞 
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞 
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞 
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞 
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞 
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞 
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞 
Hep3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞 
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞 
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞 
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞 
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞 
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞 
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞 
L 428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞 
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 
GP2-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞 
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞 
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞 
NCIH2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞 
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞 
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞 
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞 
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞 
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞 
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞 
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞 
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞 
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞 
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞 
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞 
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞 
NCI-H165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞 
GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞 
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 
H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞 
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 
SUM-159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞 
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 
HHUA 人子宮內(nèi)膜癌細胞系
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞 
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞 
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞 
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞 
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞 
SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞 
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞 
C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞 
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細胞、RT-112細胞、AE1201細胞 
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細胞、RKO-AS45-1細胞、H-1793細胞 
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、HL7702細胞、Vero-76細胞 
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