"MM96L 人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；女性 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MM96L 人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉海梦艽荡蛑瞥杉?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁 
MM96L 人黑色素瘤細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞 
T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞 
WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞 
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞 
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞 
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞 
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞 
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞 
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞 
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞 
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞 
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞 
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞 
SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞 
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞 
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞 
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞 
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞 
H-250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H520細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞 
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞 
MM96L 人黑色素瘤細(xì)胞系
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞 
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞 
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞 
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞 
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞 
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞 
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞 
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞 
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 
Caki-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA-87細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞 
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞 
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞 
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞 
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞 
293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞 
HCT-FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞 
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞 
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞 
Tu-686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞 
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞 
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞 
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞 
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞 
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞 
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞 
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞 
TR 146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞 
HSAS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞 
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞 
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞 
MESSA-DX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞 
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞 
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞 
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞 
LC-1 sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞 
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞 
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞 
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞 
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞 
MM96L 人黑色素瘤細(xì)胞系
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞 
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞 
BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞 
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞 
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞 
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞 
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞 
U031細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL299細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞 
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞 
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、HEB細(xì)胞 
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞 
WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Colon38細(xì)胞 
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