"MM96L Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;女性 GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞 P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞 K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞 Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MM96L Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞 Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞 SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞 MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞 EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 MM96L Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞 kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞 SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞 HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞 TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞 L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞 T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞 MM96L Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞 MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞 SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞 HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞 H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞 SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞 MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞 NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞 HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞 HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞 Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞 Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞 NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞 SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞 IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞 HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞 NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞 HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞 SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞 UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞 HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞 HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞 NCI-H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞 L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞 LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞 Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞 H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞 Human Liver-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞 SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞 PG-4 (S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細(xì)胞、MCF7細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞 G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞 SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞 32D CL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞 AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞 GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞 GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞 SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞 3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞 MM96L Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系 MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞 CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞 M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞 Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞 HSC(Human Schwann)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞 G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞 Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞 Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞 Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞 PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞 VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞 "
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