"GAK 人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
GAK 人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。 
細胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm. 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
GAK 人類惡性黑色素瘤細胞系
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現。 
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣 
QBC(939)細胞系相關產品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞 
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Colon 26細胞系相關產品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞 
LAN1細胞系相關產品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞 
3AO細胞系相關產品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞 
NCIH2347細胞系相關產品：SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞 
Hs 578Bst細胞系相關產品：HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞 
H.Ep. #2細胞系相關產品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 
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D407細胞系相關產品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞 
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NCI-H250細胞系相關產品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 
MDCC-MSB1細胞系相關產品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞 
SK-MEL-2細胞系相關產品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞 
GM04154細胞系相關產品：NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞 
SNU-475細胞系相關產品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞 
ATDC-5細胞系相關產品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞 
GAK 人類惡性黑色素瘤細胞系
HEK-2細胞系相關產品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞 
87 MG細胞系相關產品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞 
MDCK2細胞系相關產品：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞 
JURKAT E-6.1細胞系相關產品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞 
F442A細胞系相關產品：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞 
MC-4細胞系相關產品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞 
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P3.times.63 Ag8.653細胞系相關產品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞 
WIL2 Secreting細胞系相關產品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞 
ANA-1細胞系相關產品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞 
NCIH378細胞系相關產品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞 
CEMx721.174.T2細胞系相關產品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 
T1-73細胞系相關產品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞 
MADB106細胞系相關產品：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞 
SGC7901細胞系相關產品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞 
G-292細胞系相關產品：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞 
MHCC 97-H細胞系相關產品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞 
526 mel細胞系相關產品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞 
NCIH209細胞系相關產品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞 
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Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 
RKO-E6細胞系相關產品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞 
IMCD-3細胞系相關產品：NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞 
P3/ag細胞系相關產品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞 
MC3T3-E1(C4)細胞系相關產品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞 
CCD18細胞系相關產品：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞 
HM06.A1細胞系相關產品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞 
GM04680細胞系相關產品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞 
CCC-HIE-2細胞系相關產品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞 
SV-HUC-1細胞系相關產品：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞 
HPBALL細胞系相關產品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞 
HPAF-II細胞系相關產品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 
NFS60細胞系相關產品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞 
SCC9細胞系相關產品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞 
McArdle RH-7777細胞系相關產品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 
PNEC30細胞系相關產品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞 
HRA-19細胞系相關產品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞 
HSCT6細胞系相關產品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 
HFL-1細胞系相關產品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞 
H-1648細胞系相關產品：OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞 
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關產品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞 
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Anip 973細胞系相關產品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞 
huH 1細胞系相關產品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞 
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SF 295細胞系相關產品：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞 
H1930細胞系相關產品：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞 
C32 [Human melanoma]細胞系相關產品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 
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HCT8細胞系相關產品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞 
HCC-1143細胞系相關產品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、RPMI #1846細胞、CoC1細胞 
Det. 562細胞系相關產品：H19-7細胞、COLO-320-HSR細胞、HEK293-EBNA1細胞 
Nthy ori 3.1細胞系相關產品：SKOV-3細胞、CCD18細胞、NCIH510細胞 
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