"B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。 
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng) 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮鳎傆X得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。 
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣 
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞 
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞 
GM-215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2286細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞 
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞 
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞 
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞 
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞 
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞 
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞 
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞 
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞 
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞 
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞 
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞 
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞 
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞 
IMR-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞 
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞 
Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞 
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞 
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞 
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞 
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞 
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞 
HRA19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞 
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞 
SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞 
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞 
NB1-RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10.G4.1細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞 
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞 
PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞 
C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞 
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞 
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞 
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞 
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞 
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞 
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞 
MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞 
Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞 
PIG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L78細(xì)胞、FTC133細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞 
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞 
HB 611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞 
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞 
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞 
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞 
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞 
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞 
NCIH3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞 
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞 
Mel624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞 
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞 
H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞 
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞 
BJA-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞 
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細(xì)胞、ABE­8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞 
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞 
B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞 
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞 
AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly7細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞 
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞 
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞 
PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞 
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞 
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞 
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞 
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、MA 104細(xì)胞 
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞 
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