"B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：B１６-F１０是B１６-F０的亞系。 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。 
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁生長 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞 
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞 
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞 
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞 
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞 
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞 
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞 
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞 
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞 
SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞 
Duke University 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190PT細(xì)胞、EM3細(xì)胞、CMT64細(xì)胞 
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞 
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞 
HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞 
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞 
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞 
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞 
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞 
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞 
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞 
P1-Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞 
AC29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞 
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞 
KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞 
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞 
NCI-H1668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞 
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞 
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞 
BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞 
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞 
HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞 
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞 
U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞 
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞 
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞 
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞 
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞 
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞 
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞 
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞 
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞 
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞 
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞 
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞 
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞 
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞 
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞 
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞 
CCK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞 
U031細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL299細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞 
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞 
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞 
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞 
SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞 
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞 
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞 
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞 
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞 
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞 
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞 
AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞 
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞 
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞 
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞 
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、MC/9細(xì)胞 
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞 
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、MM134細(xì)胞 
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