"B16-F10 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：B１６-F１０是B１６-F０的亞系。 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。 
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細胞系
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞 
H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞 
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞 
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞 
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞 
KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞 
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞 
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞 
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞 
Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞 
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞 
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞 
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞 
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞 
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞 
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞 
HLFa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞 
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞 
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細胞系
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞 
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞 
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞 
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞 
P1-Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞 
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞 
NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞 
KYSE 270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞 
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞 
NCI-H1668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞 
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 
UMUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞 
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞 
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞 
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞 
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞 
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞 
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞 
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞 
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞 
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞 
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞 
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞 
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞 
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞 
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞 
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞 
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞 
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞 
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞 
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞 
U031細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞 
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞 
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞 
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞 
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞 
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞 
B16-F10 小鼠黑色素瘤細胞系
HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞 
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞 
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞 
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞 
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞 
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞 
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞 
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞 
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、OC-316細胞、MC/9細胞 
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細胞、HuH6細胞、NCIH820細胞 
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、SU-DHL-6細胞、MM134細胞 
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