"F9 Thawing小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
F9 Thawing小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
F9 Thawing小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
H766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
GM05372細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞
H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細(xì)胞、H-292細(xì)胞、3LL細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、H1048細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
HT-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
F9 Thawing小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞
J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
MOLP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細(xì)胞、H-510A細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞
NCI-SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞、H2591細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
NCI-H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細(xì)胞、V79細(xì)胞、H2087細(xì)胞
SVOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細(xì)胞、HCC94細(xì)胞、B10BR細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
F9 Thawing小鼠畸胎瘤細(xì)胞系
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
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