"F9 Adherent小鼠畸胎瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品:H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
HEK-293A細胞系相關產(chǎn)品:ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H510A細胞系相關產(chǎn)品:DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞
HSAS1細胞系相關產(chǎn)品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
MGSMC細胞系相關產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
NCI-HUT-460細胞系相關產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
T 84細胞系相關產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
NCI-H146細胞系相關產(chǎn)品:B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
Colo16細胞系相關產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
MV 3細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
TE-5細胞系相關產(chǎn)品:Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞
HS852.T細胞系相關產(chǎn)品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
NPA'87細胞系相關產(chǎn)品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
C643細胞系相關產(chǎn)品:VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
JEKO細胞系相關產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
KNS-42細胞系相關產(chǎn)品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細胞系
GP-293細胞系相關產(chǎn)品:Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
MM-1S細胞系相關產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
SU-DHL1細胞系相關產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
Rat Lung-65細胞系相關產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
JCA1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
HL60細胞系相關產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
PANC1005細胞系相關產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
HEp-2細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
MFD-1細胞系相關產(chǎn)品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
H-2405細胞系相關產(chǎn)品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
Mino細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
RC-4B/C細胞系相關產(chǎn)品:SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品:IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
McA-RH7777細胞系相關產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
TE15細胞系相關產(chǎn)品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
BC-3-H-I細胞系相關產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
GC-1 spg細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
KMH-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
NCI-H2170細胞系相關產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
VMM-5A細胞系相關產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
GS9L細胞系相關產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
SKRC-39細胞系相關產(chǎn)品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
Chang liver細胞系相關產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
EA hy 926細胞系相關產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
BE2C細胞系相關產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
PFSK1細胞系相關產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
EC-GI細胞系相關產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
EBC1細胞系相關產(chǎn)品:Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
KP-N-RT細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞
RPMI 1788細胞系相關產(chǎn)品:Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
F9 Adherent小鼠畸胎瘤細胞系
DHL5細胞系相關產(chǎn)品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
PLC-PRF-5細胞系相關產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
HMSC細胞系相關產(chǎn)品:A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
OCI-LY-18細胞系相關產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
MS751細胞系相關產(chǎn)品:INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:PaTu8988s細胞、L02細胞、U-138MG細胞
CAL-12T細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7404細胞、Hep 3B2細胞、GES1細胞
NCI-H146細胞系相關產(chǎn)品:B16-F10細胞、CORL105細胞、BIU-87細胞
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