"P815 Thawing小鼠肥大細胞瘤細胞系
細胞背景資料：肥大細胞瘤；雄性；DBA/２
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
P815 Thawing小鼠肥大細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
P815 Thawing小鼠肥大細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
NMCG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細胞、Panc3_27細胞、TM4細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H1672細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
OCI-Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
MiaPaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
Ca9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
P815 Thawing小鼠肥大細胞瘤細胞系
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
FRhK-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
TE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
L428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
CMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
H-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
P815 Thawing小鼠肥大細胞瘤細胞系
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
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