"MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：骨肉瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞
T47D:A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細胞、SUDHL16細胞、CCRF/CEM細胞
CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細胞、T98細胞、U-118 MG細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細胞系
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
MDAPCa2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞
NCIH2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
Panc02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
MNNG/HOS Cl #5 Thawing人骨肉瘤細胞系
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
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