"MNNG/HOS Cl #5 Cell:人骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:骨肉瘤;女性
A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MNNG/HOS Cl #5 Cell:人骨肉瘤細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
SaOS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
細胞生長特性:貼壁
MNNG/HOS Cl #5 Cell:人骨肉瘤細胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
T9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
MNNG/HOS Cl #5 Cell:人骨肉瘤細胞系
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
TOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞
IOSE 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
OVSAHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
SW-626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
MNNG/HOS Cl #5 Cell:人骨肉瘤細胞系
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
INS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HFT8810細胞、AG06814-M細胞
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